본 연구의 목적은 PAGly가 마우스 심실 근세포의 세포내 Ca2 + 동역학에 영향을 미치는 기전을 규명하는 것이었다. 연구 결과, PAGly는 Ca2 + 동역학 에 약한 자극 효과를 나타내며 , 이러한 효과는 주로 β-아드레날린 수용체 자극 및 PKA 활성화를 통해 매개되는 것으로 나타났다. PAGly는 β-아드레날린 수용체에 대한 결합 경쟁을 통해 보다 선택적인 아드레날린 수용체 작용제의 자극 효과를 부분적으로 억제할 수 있다.

재료 및 방법

심실근세포 분리

모든 동물 사육 및 외과적 시술은 국립보건원(NIH)의 실험동물 관리 및 사용 지침( 12 )에 따라 수행되었습니다. 해당 절차는 Loyola IACUC 프로토콜 #23-027(마우스)에 따라 처리되었습니다. 2~3개월령의 C57BL/6J 마우스(수컷 8마리, 암컷 5마리, Jackson Laboratories)를 이소플루란(1%)으로 마취했습니다. 흉곽 절개 후 심장을 신속하게 적출하여 Ca2 +가 없는 완충액에 담그고 Langendorff 장치에 장착한 다음, 이전에 기술된 절차( 13 , 14 , 15 ) 에 따라 Liberase H(Roche Sigma-Aldrich; St Louis, MO, USA)를 함유한 용액(37°C)으로 역행성 관류했습니다 . 소화된 심장에서 좌심실을 적출하여 소 혈청 알부민 1 mg/mL을 함유한 정지 완충액에 넣고, 여러 조각(평균 크기 1 mm)으로 자른 후, 조심스럽게 분쇄하여 분리된 심근세포 현탁액을 만들었다. 그런 다음, 심근세포를 중력에 의해 원심분리하여 침전시키고(약 0.1 mL), 저농도 Ca²⁺ Tyrode 완충액(조성: NaCl 140 mM; KCl 4 mM; CaCl₂ 0.1 mM; MgCl₂ 1 mM; 포도당 10 mM; HEPES 10 mM; pH 7.4)에 재현탁시켰다 . [ Ca²⁺ ] 농도는 1 mM이 될 때까지 점진적으로 조절하였다. 분리된 심근세포는 실험 동안 실온(20°C)에서 보관하였다. 모든 화학물질과 시약은 Sigma-Aldrich에서 구입하였다.

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